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Ciclo celular e índice de fases

Ciclo celular

I. Introducción:

La división celular es la base sobre la que se erige toda la vida, si ella un organismo no podría mantenerse en el tiempo. 
La división celular establece dos etapas. En la primera, la célula se divide originando dos células hijas con el mismo material celular y genético. 
La mitosis es un método exacto para controlar la transmisión de los rasgos de herencia de una célula a otro durante la división celular. Es el mecanismo que genera nuevas células y reemplaza las células dañadas en los organismos multicelulares. El término mitosis se refiere a la secuencia de cambios que ocurre en el núcleo antes de la división celular.
Se divide en cuatro fases:
  • Profase: Los cromosomas se visualizan mientras que los nucléolos inician el proceso de desorganización. Los filamentos cromosómicos, anteriormente extendidos, se enrollan, volviéndose cortos y gruesos. En la profase tardía se aprecia que cada cromosoma está constituido por dos cromátides. La envoltura nuclear empieza a desaparecer.
  • Metafase: Se caracteriza por la aparición del huso mitótico. Los cromosomas alcanzan el plano ecuatorial. 
  • Anafase: Comienza en el momento en que las cromátides se separan una de otra. Cada cromátide está unida a la fibra del huso a través de su centrómero y se dirige hacia los polos opuestos.
  • Telofase: El final de la migración polar de los cromosomas hijos indica el comienzo de esta fase. Los cromosomas se descondensan, los nucléolos se reorganizan y la envoltura nuclear se forma paulatinamente alrededor de los cromosomas. Simultáneamente se produce la citocinesis, en las células vegetales por la formación del fragmoplasto y en las animales por el anillo contráctil de actina y miosina.

II. Materiales:

-Raíces de bulbo de cebolla (Allium cepa)
-Placa petri
-Láminas y laminillas
-Mechero de alcohol
-Orceína aceto clorhídrica al 2%
-Microscopio compuesto
-Papel absorbente
-Gillette
-Pinza

III. Procedimiento:

  1. Escoger un bulbo de cebolla fresca.
  2. Quitar las raíces y fibras secas de la base del bulbo.
  3. Inserte tres palillos en el plano ecuatorial del bulbo, de modo que este pueda suspenderse en un pequeño vaso o recipiente con agua. La base del bulbo debe estar tocando justamente la superficie del agua. Las raíces empezarán a crecer en dos o tres días. Cambiar el agua diariamente.
  4. Corte, con una pinza, las raíces del bulbo a 1 cm de la parte apical y colóquela en una superficie lisa donde pueda realizar un segundo corte, esta vez con la gillete, a 2 mm de la parte apical.
  5. Coloque los cortes sobre una placa petri que contenga orceína aceto clorhídrica al 2%.
  6. Caliente la placa en la llama de un mechero por un lapso de 3-4 segundos o hasta que pueda observar la emisión de vapores blancos. Este proceso deberá repetirse 3 o 4 veces dejando enfriar hasta la temperatura ambiente en los lapsos intermedios.
  7. Después del último calentamiento deje enfriar y reposar durante 7 a 10 minutos.
  8. Coloque una raicilla en una lámina añada una gota de orceína fría. Coloque una laminilla sobre ella.
  9. Con el borrador de un lápiz realice un golpe seco en el centro de la laminilla y luego golpee suavemente de manera concéntrica para permitir la extensión del tejido meristemático. 
  10. Elimine el exceso de colorante usando papel absorbente y realice el aplastamiento (squash).
  11. Observe la preparación al microscopio.
Allium cepa, meristemo apical radicular, orceína aceto
clorhídrica, aumento 400X. A: Células en interfase.
B: Células diferenciadas. C: Células en telofase tardía.

Allium cepa, meristemo apical radicular, orceína aceto 
clorhídrica, aumento 400X. A: Célula en metafase.
Allium cepa, meristemo apical radicular, orceína aceto 
clorhídrica, aumento 400X. A: Célula en prometafase,
B: Célula en telofase temprana. C: Célula en metafase

Allium cepa, meristemo apical radicular, orceína aceto 
clorhídrica, aumento 400X. A: Célula en interfase.
B: Célula en prometafase. C: Célula en profase
D: célula en metafase

Allium cepa, meristemo apical radicular, orceína aceto 
clorhídrica, aumento 400X. A: Célula en anafase tardía
B: Células en metafase. C: Célula en profase. 
D: Célula en anafase. El puntero señala una célula 
anafase tardía.

Allium cepa, meristemo apical radicular, orceína aceto 
clorhídrica, aumento 400X. A: Célula en interfase
B: Célula en profase. C: Célula en anafase. 
D: Célula en metafase.

Allium cepa, meristemo apical radicular, orceína aceto 
clorhídrica, aumento 400X. A: Célula en interfase.
B: Célula en profase. C: Célula en metafase.

Índice de fases

A partir de estas micrografías podremos calcular el índice de fases del tejido meristemático. El índice de fases nos indica el porcentaje de células que se encuentran en determinada fase en un tejido. Es necesario calcular el índice de fases debido a que las células son asincrónicas, es decir, realizan su ciclo celular independientemente del resto. 
La aproximación más sencilla de la medida del ciclo celular que puede hacerse es contar un determinado número de células y ver cuántas de ellas están en mitosis y en que fase.
El indice mitótico se calcula como el cociente del número de células en mitosis con el número total de células contadas por 100. El indice de fases se determina como el cociente del número de células en una fase determinada con el número de células en mitosis por 100.
Los valores normales de los índices son los siguientes:
  • Índice mitótico: 30%
  • Índice de profase: 53.33%
  • Índice de metafase: 13.33 %
  • Índice de anafase: 6.67 %
  • Índice de telofase: 26.67%

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