Tipos básicos de tinción en células eucariotas

Tipos básicos de tinción en células eucariotas

Todos los organismos comparten los mismos constituyentes básicos: las células. Aunque las características de las células varían de una célula a otra, existen aspectos básicos que comparten todos los tipos celulares como son: Una membrana plasmática externa que rodea la célula, el modo de almacenamiento de la información (en polinucleótidos), un metabolismo que transforma su medio para satisfacer sus necesidades bioquímicas, todas las células establecen respuestas ante los estímulos tanto internos como externos a corto y largo plazo (irritabilidad y evolución), etc.

En esta práctica comprobaremos que son las células los constituyentes básicos de los organismos al observar muestras de tejidos tanto animal como vegetal. También observaremos las diferentes formas que pueden tomar las células tanto animales como vegetales y estableceremos tanto puntos en común entre ambos tipos celulares como sus divergencias. 

Materiales

-Microscopio compuesto.

-Láminas y laminillas.

-Solución de azul de metileno.

-Solución de lugol.

-Colorante Wright.

-Pinzas.

-Lancetas hematológicas.

-Hoja de afeitar.

-Goteros.

-Allium cepa (cebolla).

-Alcohol yodado, agua destilada.

-Algodón.

Desarrollo 

A. Observación de las células epiteliales de la mucosa bucal:

1. Cuidadosamente con el extremo de una lámina limpia o un hisopo, raspe la superficie interna de la mejilla; al hacer esto la fricción provocada entre el hisopo o lamina y la mejilla provocará que la célula se desprenda del tejido bucal y sea recogida por el hisopo o lamina.
2. Deposite el material obtenido en una lámina portaobjeto (frotis).
3. Secar al medio ambiente la lámina que contiene la muestra por 5 minutos.
4. Cubrir la muestra con azul de metileno durante 10 minutos.
5. Eliminar el exceso de colorante y lavar con agua corriente.
6. Secar la lámina y observar al microscopio.

Frotis bucal humano, células epiteliales de la mucosa bucal,
tinte: azul de metileno, aumento: 100X. Las células
poseen un aspecto amorfo con un núcleo intensamente teñido

Frotis bucal, células epiteliales de la mucosa bucal,
tinte: azul de metileno, aumento: 400X. 

B. Observación de las células epiteliales del catáfilo de cebolla (allium cepa):

Las células del catáfilo de la cebolla no poseen función fotosintética, por lo que no observaremos cloroplastos; sin embargo, si podremos visualizar otras estructuras celulares.

1. Extraiga un pequeño fragmento de la epidermis interna del catáfilo de cebolla.
2. Utilizando la lámina y laminilla, monte la preparación, coloreando con solución de lugol.
3. Observe al microscopio.

Allium cepa, catáfilo, se ha colocado la muestra en un medio
de lugol, aumento: 100X. Las células están apiladas, poseen formas
casi geométricas y carecen de cloroplastos,

C. Observación de formas de núcleo en leucocitos humanos:

Los leucocitos son un tipo celular del tejido conectivo con capacidades inmunológicas, se dividen en granulocitos y agranulocitos. Los granulocitos, a su vez, se dividen en eosinófilos, neutrófilos y basófilos. Los agranulocitos se subdividen en monocitos y linfocitos. Cada uno de estos tipos celulares posee características externas distintivas que nos permite reconocerlos. 

1. Desinfectar el dedo anular con alcohol yodado y algodón. Con una lanceta estéril punzar el dedo y dejar caer una gota de sangre sobre un extremos de la lámina portaobjetos.
2. Con ayuda de otra lámina formar un ángulo de 45º y realizar un frotis, tratando de esparcir homogéneamente la gota de sangre sobre la superficie de la lámina.
3. Dejar secar la preparación 5 minutos al ambiente y proceder luego a la coloración.
4. Cubrir el frotis con el colorante de Wright por 1 minuto.
5. Sin eliminar el colorante agregar agua destilada y dejar actuar por 10 minutos.
6. Eliminar luego el colorante y lavar suavemente con agua de caño.
7. Dejar secar la lámina coloreada.
8. Una vez que la lámina coloreada ha secado, observar al microscopio con el objetivo de inmersión y aceite de inmersión.

Extraído de:
Guía de laboratorio de Biología celular UNMSM, Lazo F, Suyo M, Vivas D, Lima, 2016, pág 11-14 .